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解析分光光度計儀器組成原理操作方法

儀器組成

分光光度計已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃

原理

分光光度計采用個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(cháng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源，光線(xiàn)透過(guò)測試的樣品后，分光線(xiàn)被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過(guò)被測物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(cháng)度）成正比，其關(guān)系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強度；

I 為透射的單色光強度；

T 為物質(zhì)的透射率；

k 為摩爾吸收系數；

L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長(cháng)；

c 為物質(zhì)的濃度；

操作方法

1.接通電源，打開(kāi)儀器開(kāi)關(guān)，掀開(kāi)樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開(kāi)關(guān)調至“1"檔（若零點(diǎn)調節器調不到“0"時(shí)，需選用較。）

3.根據所需波長(cháng)轉動(dòng)波長(cháng)選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。

5.在暗箱蓋開(kāi)啟狀態(tài)下調節零點(diǎn)調節器，使讀數盤(pán)針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節“100"調節器，使空白管的t=100，針?lè )€定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈